Esta solución se ocupa para mantener a las células en condiciones fisiológicas estables durante periodos cortos, así como la preparación de tratamientos, administración agentes xenobióticos o la inoculación de células cancerígenes en ratones. NOTA: La capacidad amortiguadora es proporcionada por las sales de fosfato.
La preparación es la siguiente:
- Se disuelve en 800mL de agua ultra pura
- Después se mezcla en agitación constante en una placa de agitación
- Se ajusta el pH a 7.5 utilizando una disolución de HCl 8N
- Se afora a un volumen final de 1000 mL
- Posteriormente se esteriliza en autoclave por 20 min a 15 psi y 120°C o por filtración con una membrana de 0.22 μm.
- Y se almacena a 4°C hasta su uso
| Reactivo | Concentración 1X | 1X | Concentración 10X | 10X |
| Cloruro de Sodio NaCl | 137 mM | 8 g | 1.37 M | 80 g |
| Cloruro de potasio, KCl | 2.7 mM | 0.2 g | 27 mM | 2 g |
| Fosfato de sodio monobásico, Na2HPO4 | 10 mM | 1.44 g | 100 mM | 14.4 g |
| Fosfato de potasio dibásico, KH2PO4 | 1.8 mM | 0.24 g | 18 mM | 2.4 g |
| De ser necesario, el PBS puede suplementarse con : | ||||
| CaCl2•2H2O | 1 mM | 0.133 g | 10 mM | 1.33 g |
| MgCl2•6H2O | 0.5 mM | 0.10 g | 5 mM | 1.0 g |
NOTA: para uso en cultivo celular es recomendable usarlo con cloruro de calcio y magnesio, ya que se evita que las células adherentes se desprendan de la superficie.
Cómo citar: Checa Rojas, A. (2017, 24 de Noviembre ) Método: Disolución amortiguadora de fosfatos (PBS). Conogasi, Conocimiento para la vida. Fecha de consulta: Diciembre 21, 2024
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1 Comentario en "Método: Disolución amortiguadora de fosfatos (PBS)"
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